В качестве модельного животного был выбран сирийский хомячок, который восприимчив к коронавирусу. Ученые исследовали как терапевтический (когда антитела вводятся после заражения), так и профилактический эффект (до инфицирования). Терапевтическая группа получала 10 мг одного из антител на килограмм веса через 6 часов после заражения вирусом. Животным двух профилактических групп за сутки перед заражением вводили две разные дозы: 10 мг/кг веса  и 1 мг/кг веса. «Такие дозировки используются для удобства пересчета при испытаниях на человеке или других животных. Сирийские хомячки болеют не очень тяжело, для оценки защитного эффекта антител применяют два метода. Во-первых, изменение веса (у зараженных он довольно существенно падает, они могут терять до 15 % от исходного веса в течение пяти дней). Во-вторых, изучается количество копий РНК вируса в легких или трахеях на второй и пятый дни после заражения», — рассказывает руководитель лаборатории иммуногенетики доктор биологических наук Александр Владимирович Таранин.

Исследователи обнаружили, что при профилактическом введении антитела в дозе 10 мг/кг веса вирус в легких у опытных животных не детектируется. У хомяков из контрольной группы, которые не подвергались лечению, количество копий РНК коронавируса достигало 107. Терапевтическое применение антитела также дало очень хорошие результаты. У четырех из шести животных вирус не был обнаружен, у двух — количество на грани выявления. Хомячки, получившие антитела, не потеряли в весе, в отличие от контрольных, у которых вес снизился в среднем на 10 %.

 

В данный момент это единственный в России продукт, который может стать реальным средством терапии коронавирусной инфекции, хоть и недешевым. Американские компании Eli Lilly и Regeneron Pharmaceuticals совсем недавно завершили серию клинических испытаний аналогичных моноклональных антител, которые показали хорошие результаты. «Они начали работу в январе-феврале, то есть уложились в восемь месяцев. В связи с этим, нас удивляет инертная реакция тех российских государственных структур, которые имеют отношение к противодействию коронавирусной пандемии. Мы сделали заявление о первых результатах летом и если бы получили помощь, могли бы значительно ускорить работу. У нас были только наши собственные ресурсы  и небольшой грант РФФИ», — говорит Александр Владимирович.

К созданию антител в ИМКБ СО РАН приступили в апреле. Два месяца ушли на предварительную работу: ученые готовили антигены, чтобы проводить работу по сортировке и анализу клеток. В конце мая благодаря коллегам из ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий ФМБА России» исследователи получили образцы крови доноров из Москвы. Через полтора месяца были созданы первые антитела. «Мы выявили в индивидуальных вирус-специфичных В-клетках переболевших доноров 28 экспрессируемых генов антител. Необходимо было клонировать все эти гены, получить конструкции для наработки антител в рекомбинантном виде, провести наработку, создать клеточные линии и молекулярные инструменты для оценки свойств антител, включая их эпитопную специфичность, аффинность (родственность) и способность блокировать проникновение вируса в клетки. На оценку свойств антител ушло больше трех месяцев, из них более месяца заняла работа на двухканальном биослойном интерферометре. Если бы у нас была установка с высокой производительностью (16 каналов), мы бы справились с этой работой за три дня. Всё и складывается из таких деталей, которые затягивают работу. В случае разумной поддержки и координации исследований мы не отстали бы от американцев далеко», — отмечает Александр Владимирович.

Испытания антител на животных проводили совместно с отделом экспериментального моделирования и патогенеза инфекционных заболеваний Федерального исследовательского центра фундаментальной и трансляционной медицины, которым руководит доктор биологических наук Александр Михайлович Шестопалов. «У отдела есть возможность работать с живым вирусом. Но условия также далеки от идеальных. И они тоже делали эту работу на энтузиазме с расходованием собственных ресурсов» — объясняет Александр Таранин.

Теперь нужно проверить на животных защитные свойства сочетаний антител против разных эпитопов (участков вирусного спайк-белка). Использование подобных «коктейлей» может оказаться важным для сохранения нейтрализующей активности антител при мутировании коронавируса. Значительную помощь в проведении испытаний противовирусных свойств моноклональных антител на животных мог бы оказать Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор», где имеются все необходимые условия и компетенции для такой работы. Только ИМКБ СО РАН и ГНЦ «Вектор» относятся к разным ведомствам и совместная работа предполагает договоренности руководителей этих ведомств.

Необходимо создать промышленный клеточный продуцент выбранных для клинического применения антител и масштабировать их наработку. Только с использованием таких промышленных образцов можно начать токсикологические и клинические испытания. «Мы могли бы создать клеточные продуценты антител, но в институте нет технологической базы для их промышленного производства. Тем не менее, в России имеются фармацевтические компании, обладающие необходимыми мощностями и я надеюсь, что какая-то из них возьмется за эту работу. Однако, очевидно, что дальнейшее развитие вряд ли будет возможным без четкой государственной позиции. Для примера, компания Regeneron весной получила от правительства США 450 миллионов долларов с обязательством произвести 300 000 доз терапевтических антител», — добавляет ученый.

https://www.mk.ru/science/2020/10/22/v-rossii-poluchili-monoklonalnye-antitela-k-koronavirusu.html

В России получили моноклональные антитела к коронавирусу

Специально заразили и буквально за два дня вылечили от коронавируса своих «пациентов» ученые Института молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения РАН. Правда, речь идет о сирийских хомячках, на которых специалисты проверяли действие впервые полученного ими в России моноклонального антитела. По сути, это выжимка самых активных антител к коронавирусу из человеческой плазмы. Корреспондент «МК» узнал в деталях результаты эксперимента.

Препараты на основе антител к коронавирусу разрабатываются во всем мире. Они отличаются от переливаемой плазмы переболевших COVID-19 пациентов большей концентрацией нейтрализующих частиц. Впереди всех, конечно, американцы, которые еще в июне начали проводить клинические испытания «концентрата антител» и даже успели ввести «лошадиную дозу» (около 8 граммов антитела) своему президенту Трампу, когда он имел неосторожность заразиться коронавирусом.

ФОТО: RU.WIKIPEDIA.ORG

 

Подробно о том, как создаются моноклональные антитела, «МК» писал в номере за 14 мая. Так вот, сибирским ученым удалось создать целую панель из восьми моноклональных антител человека, эффективно нейтрализующих SARS-CoV-2. Выделили их из донорской крови переболевших ковидом москвичей.

Как сообщили «МК» в лаборатории иммуногенетики ИМКБ СО РАН, доказать действие «концентрированных антител» решили на сирийских хомячках. Почему именно на них? Сирийские, или золотистые, хомячки в отличие от других лабораторных животных — мышей и крыс — способны заражаться коронавирусом. К тому же новосибирцы решили использовать именно эту линию лабораторных, специально выведенных животных для более достоверного сравнения результатов со своими западными коллегами, в США ученые проводили свои опыты по влиянию моноклональных антител также на сирийских хомячках.

Испытания антител на животных проводили совместно с отделом экспериментального моделирования и патогенеза инфекционных заболеваний Федерального исследовательского центра фундаментальной и трансляционной медицины, у которого есть разрешение для работы с живым вирусом.

Сирийские хомячки, которым вводили моноклональные антитела, а через день специально заражали коронавирусом, не проявляли никаких признаков болезни. Они продолжали вести активный образ жизни, сохраняя прежний вес. Контрольная же группа грызунов, которым не вводили специфические антитела, худела на глазах, теряя до 15% от исходного веса в течение пяти дней. Однако это были лишь визуальные изменения. Чтобы понять, что происходит с организмами хомячков на молекулярном уровне, у них после усыпления проверили наличие вируса SARS-CoV-2 в легких. Оказалось, что у тех, которым вводили моноклональные антитела, вируса не было уже на второй день после заражения, а в контрольной группе он присутствовал в довольно большом количестве — 10 миллионов вирусных частиц на миллиграмм ткани.

Примерно такой же по эффективности ответ получили иммунологи при испытаниях терапевтического действия моноклонального антитела. Для этого они сначала заражали своих подопытных животных, а через 6 часов вводили препарат из расчета 10 мг одного из антител на килограмм веса. Также через два дня действия на организм грызунов вирус у основной группы уже не выявлялся.

Однако радоваться и хлопать в ладоши не стоит — ученые выделяют несколько нюансов моноклональных антител. Их защитное действие при профилактическом применении длится недолго — около месяца. Что же касается лечебного эффекта, он замечен только при введении препарата на самой первой (на ранних) стадии заболевания.

И тем не менее в качестве скорой помощи при высоком риске заражения или в первые дни после инфицирования концентрат активных антител мог бы сослужить людям хорошую службу. Тем более что вакцинация тоже имеет свои ограничения. К примеру, до сих пор неизвестно, насколько длительна иммунологическая память, а некоторым категориям граждан введение вакцины и вовсе противопоказано.

Заявление о первых результатах сибирские ученые сделали еще летом, но поддерживать их никто не торопится. Прежде чем моноклональные антитела станут противовирусным лекарством, необходимы масштабирование их производства, а также оценка свойств в ходе доклинических и клинических испытаний.

«Интеррос» регистрирует новую вакцину против коронавируса

В гонку вакцин включился Федеральный научный центр имени Чумакова РАН

Вам «Спутник V» или «ЭпиВакКорону»?

Российская вакцина от коронавируса «Спутник V» взбудоражила западный мир